E para finalizar o Sistema Capilar.

PROTOCOLO PARA ANÁLISE DE PRODUTOS DE AMPLIFICAÇÃO EM
SISTEMA CAPILAR:

Antes da injeção no capilar, as amostras são desnaturadas em presença de
formamida, para evitar que a formação de estruturas secundárias afete a velocidade
de migração. Um padrão de tamanhos conhecidos é aplicado junto com as amostras
para permitir a estimativa do tamanho dos fragmentos analisados.

Procedimento:

1. Preparar o MIX de formamida + padrão interno de tamanho de fragmentos:

para cada amostra, colocar 8,85 µL de formamida Hi-Di e 0,15 µL de padrão

(GS 500 ROX).

2. Aplicar esses 9 µL de MIX em um pocinho da placa de corrida

3. Aplicar 1 µL de produto de PCR da sua amostra por pocinho

4. Desnaturar as amostras (já na placa de corrida) durante 5 minutos à 95ºC

5. Colocar as amostras imediatamente no gelo após a desnaturação,

permanecendo por 5 minutos.

6. Preparar a injeção das amostras no computador, através do software Data

Collection